Recuento de hematíes (RBC)

FUNDAMENTO
Se diluye la sangre problema y se cuentan los hematíes en algunos cuadrados de los retículos de la cámara.

INTRODUCCIÓN
El RBC consiste en la determinación del número de eritrocitos presentes en un volumen determinado de sangre, generalmente en 1 mm3

MATERIAL

• Pipeta diluidora de Thoma para glóbulos rojos con tubo de goma 
• Cámara de recuento
• Cubre
• Microscópio
• REACTIVOS: líquido de Hayem

MUESTRA
Sangre venosa

PROCEDIMIENTO
1.- Con la pipeta de Thoma aspiramos con sangre hasta 0.5 si creemos que hay una policitemia o hasta 1 si creemos que hay anemia.
2.- Aspiramos hasta 101 con líquido Hayem
3.- Agitamos 2 o 3 minutos suavemente para homogeneizar la mezcla y desechamos las 3 primeras gotas
4.- Depositamos una gota entre el cubre y la cámara en ambos lados de ésta
5.- Enfocamos con el objetivo de 40x y contamos los hematíes presentes en 80 cuadros del grande central. Para ello contamos las esquinas y el centro, Debemos contar los hematíes situados dentro de los cuadros y los situados arriba y a la derecha, de este modo no contaremos dos veces los mismos hematíes.


LECTURA DE RESULTADOS
Si hay disminución del RBC habrá una anemia, si por el contrario aumentase nos encontrariamos con una policitemia.
Un RBC normal se situa entre 4 y 5.5 en mujeres y entre 4.5 y 6 en hombres.

RBC = H x 5 x 10 x D 
H ... nº hematíes en los 5 cuadrados
D ... puede ser 100 o 200. Según la dilución que hayamos realizado

Recuento de plaquetas (Hemocitómetro)

FUNDAMENTO

Con esta práctica vamos a llevar a cabo un recuento de plaquetas por milímetro cúbico

MATERIAL

• Tubo de ensayo
• Pipeta de Thoma con tubo y boquilla
• Cámara de recuento
• Gasas
• Cubreobjetos
• Placa Petri
• Papel de filtro
• REACTIVOS: agua destilada y liquido de dilución: lab. Spinreact

MUESTRA

Sangre capilar o venosa recientemente extraida y anticoagulada.

PROCEDIMIENTO

1.- Vertemos 1ml de sangre en un tubo de ensayo y 1ml de líquido de dilución en otro

2.- Con la pipeta de Thoma enrasamos con sangre hasta 1 y hasta 101 con el líquido de dilución.

3.- Agitamos suavemente unos 5 minutos

4.- Desechamos las 5 primeras gotas

5.- Cargamos la cámara de recuento y la colocamos en el interior de una cámara húmeda donde vamos a dejarla reposar 15 minutos

6.- Observamos al microscópio con el objetivo de 10x y 40x.

7.- Enfocamos un cuadro grande y contamos el total de plaquetas que hay en él.

PLT/mm3 = P x D x V = P x 1.000

P ... nº de plaquetas en un mm3 

V... correción de volumen (10)

D... correcion de dilución (100)

LECTURA DE RESULTADOS

Recuento de plaquetas (frotis)

INTRODUCCIÓN
En el  recuento de plaquetas (PLT o PLQ) determinamos el número de trombocitos presentes en 1mm cúbico.
Un recuento con contadores electrónicos sería más exacto, pero de esta forma tá,bien podemos hacer un estudio morfológico de los trombocitos.

MATERIAL

• Portaobjetos para frotis
• Papel y bolígrafo
• Reactivo: líquido de inmersión

MUESTRA
Frotis teñido con panóptico rápido.

PROCEDIMIENTO
 1.- Observamos el frotis con el objetivo de inmersión
 2.- Contamos las plaquetas presentes en 10 campos microscópicos
 3.- Calculamos la cifra media del número de plaquetas contadas en los 10 campos

PLT/mm3 = PLT/C x 20.000 

PLT/ mm3 ... nº plaquetas por mm3 de sangre

20.000 ... media del nº de plaquetas contadas en varios campos

INTERPRETACIÓN CLÍNICA DE LOS RESULTADOS
Debe haber 1 plaqueta por cada 10 - 20 hematíes, 5 - 25 trombocitos por campo.
Si el nº de plaquetas por mm3 de sangre es inferior a 130.000 hay una trombocitopenia
Si es superior a 400.000 hay una trombocitosis.

Recuento de leucocitos (WBC)

MATERIAL

• Pipeta de Thoma
• Tubo de goma con boquilla para pipeta
• Cámara de recuento
• Cubre
• Reactivos: líquido de dilución Turck.(produce la lisis de los eritrocitos sin alterar los leucocitos. Tambien tiñe el nucleo de éstos con el violeta genciana que contiene)

MUESTRA
Sangre capilar o venosa anticoagulada


PROCEDIMIENTO
1.- Aspiramos la sangre con la pipeta de Thoma hasta 1 y con líquido diluyente hasta 11
2.- Agitamos con movimientos suaves unos 3 minutos
3.- Desechamos las tres primeras gotas
4.- Depositamos una gota entre la cámara y el cubre
5.- Contamos los leucocitos presentes en los 4 cuadros grandes de las esquinas, cada uno dividido en 16 cuadritos. Se cuentan con el     objetivo de 10x




LECTURA DE RESULTADOS

Como se cuentan los leucocitos en 4 cuadros grandes hay que dividir por 4 la cantidad obtenida en el recuento, y así sabremos el número de leucocitos en un cuadrado grande.
Cada cuadro mide 1mm de lado, por eso multiplicamos por 10.
Como la sangre la diluimos, hay que multiplicar el resultado anterior por 10 si se ha enrasado hasta 10 y por 20 si se ha enrasado hasta 0.5.

WBC = L/4 x 10 x 10 ( o 20 )

INTERPRETACION CLINICA
La disminución del WBC se produce en las leucopenias, su aumento se da en la leucocitosis.
Se considera normal un WBC entre 5.000 y 11.000 leucocitos por mm cúbicos.

CON MICROPIPETA haríamos una dilución de 1/10