viernes, 12 de diciembre de 2014

Contaje de reticulocitos.

INTRODUCCIÓN.

Los reticulocitos son eritrocitos inmaduros que contienen retículos e su interior con restos de ADN, mitocondrias y otros orgánulos celulares.
Su cantidad en sangre dependen de la actividad eritropoyética.

METÓDICA


FUNDAMENTO 
Con colorantes vitales como el azul de metileno o azul de cresil brillante podemos ver los reticulocitos al microscopio. Estos colorantes hacen que los restos de ADN precipiten y se observen como unos filamentos de color azul intenso en el interior de la célula.
Según el grado de maduración de los reticulocitos podremos ver redes de reticulocitos más o menos densas, correspondiendo la red más densa a los retículos más jóvenes.

MATERIAL

  • Microscopio
  • Tubos de hemólisis
  • Pipetas Pasteur
  • Portas
  • Baño de agua
  • Reactivos: Azul de cresil brillante y aceite de inmersión.
MUESTRA
Sangre venosa
 

PROCEDIMIENTO
1.. En un tubo de ensayo introducimos tres gotas de colorante azul de cresil brillante y tres gotas de sangre.
2.. Tapamos con parafilm e introducimos al baño unos 5 minutos a una temperatura de 37ºC.
3.. Sacamos el tubo de ensayo del baño y homogeneizamos suavemente
4.. Con una pipeta Pasteur cogemos unas gotas y hacemos un frotis,
5.. Observamos la muestra al microscopio con el objetivo de 100x.

LECTURA DE RESULTADOS
Al observar por el microscopio veremos los hematíes de un color verde amarillento y los reticulocitos presentaran unos hilos finos de color azul oscuro en su interior.
Para calcular el porcentaje de reticulocitos en la sangre contamos los reticulocitos y lo dividimos entre el número de hematíes contados.
Los valores normales estan entre 0'5%  y 1'5%
Habrá reticulocitosis en anemias hemolíticas y post-hemorragias, ya que aumenta la producción de hematíes para contrarrestar la pérdida de éstos.
Decimos que hay reticulopenia en anemias que dificultan la eritropoyesis.

En clase no hemos podido observar la muestra.

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