lunes, 12 de enero de 2015

Detección de crioglobulinas

FUNDAMENTO
La detección de crioglobulinas se basa en la exposición del suero problema a la acción de una temperatura baja (4ºC)
Si el suero problema contiene crioglobulinas, éstas precipitan con el frío, y el precipitado formado adopta el aspecto de partículas blanquecinas


MATERIAL
  • Pipeta Pasteur
  • Tubo de ensayo 
  • Gradilla
  • Baño de agua
  • Capilar no heparinizado (azul)
  • Plastilina
  • Centrífuga hematocrito
  • Lector de microhematocrito
MUESTRA
Suero transparente, obtenido de sangre coagulada completamente a temperatura corporal y separado del coágulo en un ambiente cálido.
Es importante evitar que la coagulación se produzca en un ambiente frío, pues esto puede dar lugar a la formación de una pequeña cantidad de crioglobulinas.

PROCEDIMIENTO
1.- Depositamos el suero problema en un tubo de ensayo y centrifugamos a 3500 rpm durante 15 minutos
2.- Colocamos el suero a unos 4ºC y observamos durante 6 dias.

LECTURA DE RESULTADOS
Si aparecen partículas blanquecinas en el suero, lo incubamos a 37ºC. Tras la incubacion, si no desaparecen las particulas , se considera que éstas se deben a restos de fibrina . Cuando estas desaparecen se estima que son crioglobulinas precipitadas (prueba positiva).
   
                                                         El grado de positividad:

                                           ASPECTO SUERO                GRADO POSITIVIDAD
                                           Discretamente turbio ....     +
                                           Francamente turbio .......    ++                
                                           Lechoso  ........................     +++


En el caso en que la prueba sea positiva, puede realizarse una semicuantificación de las crioglobulinas presentes en el suero, mediante la determinación del CRIOCITO.

Para medir el criocito:
  1.- Cogemos de la nevera (4ºC) un tubo capilar hematocrito y llenamos las 3/4 partes de éste con suero problema
  2.- Centrifugamos a 10500 rpm 5 minutos
  3.- Calculamos el % de la columna de precipitado de crioglobulinas y el ocupado por el suero total en forma de porcentaje. 




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