Determinación de la concentración de hemoglobina

FUNDAMENTO

Determinar la cantidad de hemoglobina en sangre, utilizando la técnica de la cianmetahemoglobina, mediante cálculos y mediante curva de calibración.

MATERIAL

• Tubos de ensayo
• gradilla
• espectrofotómetro
• micropipeta
• pipeta (5ml) y prepipeta
• cubetas de espectrofotómetro.
• REACTIVOS: Hemoglobin 50X (Ferricianuro de potasio (0'60mmol/l), cianuro de potasio (77mmol/l) y dihidrogeno fosfato de potasio (2mmol/l)) y patrón de hemoglobina (a diferentes concentraciones). 

MUESTRA
Sangre venosa anticoagulada

PROCEDIMIENTO
1.. Preparamos la siguiente bateria de pruebas

2.. Mezclamos e incubamos 3 minutos a temperatura ambiente
3.. Preparamos las cubetas rotulándolas igual que los tubos de ensayo
4.. Configuramos el espectofotómetro de la siguiente manera:
     longitud de onda 540nm, volumen 100, temperatura y tiempo 0.
5.. leemos la absorvancia de cada cubeta en el espectofotómetro y anotamos los resultados.

6.. Una vez anotados los datos realizamos una curva de calibración.

Partes de una cubeta y correcta forma de utilizarla.

LECTURA DE RESULTADOS