Determinación de la sideremia

FUNDAMENTO
Esta técnica se basa en la determinación de la cantidad de hierro con el espectofotómetro y aplicando la fórmula

MATERIAL

• Centrífuga
• Tubos  de ensayo y gradilla
• Micropipeta y puntas de micropipeta
• Espectrofotómetro y cubetas de espectrofotómetro
• REACTIVOS:  R1 tampón, R2 reductor, R3 color, Iron Cal (patrón). 

MUESTRA
Sangre venosa anticoagulada

PROCEDIMIENTO

1.. Enfrentamos dos tubos en la centrífuga. Uno con sangre y otro con agua con la misma cantidad.

2.. Retiramos el sobrenadante (plasma)  y lo colocamos en un tubo de ensayo.

3.. Rotulamos correctamente los tubos y preparamos la siguiente bateria de disoluciones:

 

4.. Mezclamose incubamos durante 5 minutos a 37ºC o 10 minutos a temperatura ambiente

5.. Rotulamos cada cubeta de igual manera que los tubos y vertemos el contenido de cada tubo en su cubeta correspondiente 

6.. Configuramos el espectofotómetro: 

Longitud de onda 540nm, volumen 100, tempertura 0, tiempo 0

7.. Medimos la absorbancia con el espectofotómetro y anotamos los resultados

LECTURA DE RESULTADOS
Nos han salido valores muy altos debido al mal estado de la sangre.
Para calcular el valor: 
SIDEREMIA(ug/dl) = muestra - blanco muestra/ patrón x concentración del patrón