Determinación de un Du

FUNDAMENTO
El antígeno Du es un antígeno debil que no se pone de manifiesto en las pruebas normales de determinación del Rh. Por ello debemos sensibilizar previamente los hematíes problema con un suero que contiene anticuerpos anti , y posteriormente enfrentarlos al suero de Coombs.

MATERIAL

• Tubos centrífuga 
• Pipetas pasteur
• gradilla
• Baño de agua 
• Centrífuga
• REACTIVOS: anti D, antigobulina, solución salina

MUESTRA
Hematíes al 5%

PROCEDIMIENTO
1.. En un tubo echamos una gota de hematies y una gota de anti D
2.. Mezclamos e incubamos a 37ºC 30 minutos
3.. Lavamos los hematíes 3 veces con solución salina, a la tercera decantamos completamente la solución salina
4.. Sobre el sedimento añadimos una gota de Coombs y mezclamos
5.. Centrifugamos 1000rpm 1minuto

Si hay aglutinación es positivo, tendremos el Du. Si no hay aglutinación la sangre se claificará como Rh negativo.
Para que no haya falsos positivos debidos a una sensibilización de los hematíes in vivo, realizaremos una prueba de Coombs directa, con los hematíes problema:
1.. Cogemos una gota de hematíes y añadimos suero fisiológico
2.. Centrifugamos 1000 rpm 1 minuto. Repetimos el proceso 2 o 3 veces más
3.. Resuspendemos el sedimento y añadir suero antiglobulina
4.. Centrifugamos 3500 rpm 30 segundos. Leemos los resultados