Determinación funcional fribrinógeno

FUNDAMENTO

Según el método de Von Clauss , se basa en la medición del tiempo que tarda un exceso de trombina en degradar a fibrina el fibrinogeno presente en un PPP diluido y , por tanto, en formar un coagulo

El tiempo que tarda en hacerse el coagulo de fibrina depende, de la cantidad inicial de fibrinogeno y es inversamente proporcional a la concentración de este en el plasma estudiado

MATERIAL

• 8 Tubos de ensayo de plástico
• micropipeta de 1000ul 2000ul 100ul y 200ul
• Coagulómetro. cubetas y trocitos de acero
• REACTIVOS: fibrinogene kit, plasma calibrador y agua destilada

MUESTRA
Plasma pobre en plaquetas (PPP)

PROCEDIMIENTO
1.. Homogeneizamos los reactivos
2.. Hacemos la siguiente bateria de diluciones:

Plasma calibrador	100	100	100	100	100	100	100
Muestra	0	0	0	0	0	0	100
Tampón	400	900	1400	1900	2400	2900	900
Fibrinogenemia	1/5	1/10	1/15	1/20	1/25	1/30	1/10

3.. Atemperamos la bovina a temperatura ambiente

4.. Preparamos las cubetas del coagulómetro introduciendo una barilla de acero en su interior y vertemos 200ul de cada dilución en su cubeta correspondiente.

5.. Incubamos a 37ºC dos minutos. Lo hacemos en la placa calefactora del coagulómetro

6.. Colocamos por orden todas las cubetas en el coagulómetro y vertemos 100ul de trombina bovina. En este momento se pondrá en marcha en magnetoagitador y comenzará la lectura.